在日常細胞實驗中,我們經(jīng)常需要計算細胞濃度,以進一步確定接種濃度或細胞數(shù)量。盡管自動細胞計數(shù)儀提供了快速性,但對于某些細胞,尤其是那些處于復(fù)雜狀態(tài)的細胞,有研究表明其分析性能并不一致[1](對于細胞形態(tài)的識別,所采用的是不一樣的方法)。
在臨床實踐中,因血細胞自動計數(shù)儀通常無法精準地識別細胞形態(tài),所以需使用經(jīng)典的血細胞計數(shù)板進行儀器校準。利用顯微鏡手動進行細胞計數(shù),這種方法已經(jīng)被廣泛認可[2]。
血細胞計數(shù)板規(guī)格及計數(shù)原理
血細胞計數(shù)板是一種經(jīng)典的細胞計數(shù)工具,具有上下兩個計數(shù)池。
在其上方覆蓋蓋玻片,形成深度為0.10mm的計數(shù)池。每個計數(shù)池分為9個大格,每個大格的規(guī)格為1.00mm×1.00mm。因視野所限,不易操作,容易造成較大誤差,所以一般采用定點(計數(shù)室4個角的大方格)取樣計數(shù)。(直徑較小的細胞如紅細胞,采用中間一個大方格內(nèi)標準5個區(qū)域采集計數(shù))
細胞濃度=(四個大方格的細胞數(shù)之和)/4×稀釋倍數(shù)×104個Cell/mL
博大博聚細胞計數(shù)儀的計數(shù)之道
博大博聚細胞計數(shù)儀,沿用經(jīng)典血細胞計數(shù)板的計數(shù)原理進行研制(JJG 552-1988 血細胞計數(shù)板試行檢定規(guī)程),并可搭載一次性細胞計數(shù)片,其細胞計數(shù)片與標準血細胞計數(shù)板的計數(shù)池高度相同。
①在使用血細胞計數(shù)板計數(shù)時,儀器相當于一個自帶電腦的自動化顯微成像系統(tǒng),屏幕能夠提供細胞高清圖像的實時預(yù)覽,精密的三軸聯(lián)動控制系統(tǒng),實現(xiàn)目標視野的精準走位,實時自動調(diào)焦,保證圖片的清晰度,并通過算法自動進行識別與計數(shù)。
②在使用一次性細胞計數(shù)片時,儀器屏幕會顯示虛擬刻線,刻線對應(yīng)的實際大小經(jīng)“仿細胞校準板(發(fā)明zhuanli號:ZL 2020 21855359.4)"嚴格標定,與血細胞計數(shù)板上的刻線面積(1*1mm2)一致。
③一次性細胞計數(shù)片的空腔高度設(shè)計嚴格標定為0.1mm,計數(shù)體積(0.1mm3)與血細胞計數(shù)板一致。
④在兩種耗材上,博大博聚細胞計數(shù)儀都采用標準的濃度計算公式,細胞濃度=(四個大方格的細胞數(shù)之和)/4×稀釋倍數(shù)×104個Cell/mL。
這使得博大博聚計數(shù)儀能夠?qū)崿F(xiàn)計數(shù)結(jié)果人工核對。
注意:個別型號不做兼容血球計數(shù)板的設(shè)置,但是設(shè)計原理相同(具體信息請咨詢博大博聚科技有限公司)
博大博聚的細胞計數(shù)新范式
博大博聚細胞計數(shù)儀支持非染色(發(fā)明zhuanli號ZL 2013 1 0101403.0)、臺盼藍染色和熒光染色等多種計數(shù)模式。
儀器預(yù)設(shè)多種細胞樣本類型,對于更復(fù)雜的細胞樣本,可通過自定義輔助判讀,以尋找適合不具代表性樣本的識別參數(shù)并可無限新增。
無論是秉持傳統(tǒng)方法還是融合創(chuàng)新思路,博大博聚計數(shù)儀都旨在為細胞計數(shù)和分析提供更全面的解決方案。
參考文獻
[[1]] .Borzova E. The Absolute Basophil Count. Methods Mol Biol. 2020;2163:109-124.
[[1]] Zhang M, Gu L, Zheng P, et al. Improvement of cell counting method for Neubauer counting chamber. J Clin Lab Anal. 2020;34:e23024.
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